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技術(shù)文章

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無血清培養(yǎng)基優(yōu)缺點詳解無血清培養(yǎng)基和試劑被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細(xì)胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。大多數(shù)的無血清培養(yǎng)基含有向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運離子的轉(zhuǎn)鐵蛋白和調(diào)節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素，以及一些蛋白質(zhì)和清蛋白，纖維蛋白，胎球蛋白等，這些蛋白在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同的功能，如提供細(xì)胞貼壁所需的基質(zhì)，抗生物反應(yīng)器剪切力，作為脂質(zhì)和其他生長分化因子的載體等。無血清培養(yǎng)基優(yōu)點：1、可避免血清批次間的質(zhì)量變動，提高細(xì)胞培養(yǎng)和實驗結(jié)果的重復(fù)性。2、避免血清對細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染。3、避免...

2015 6-25
造血干細(xì)胞的造血原理造血干細(xì)胞是存在于造血組織中的一群原始造血細(xì)胞，它不是組織固定細(xì)胞，可存在于造血組織及血液中。造血干細(xì)胞在人胚胎2周時可出現(xiàn)于卵黃囊，妊娠5個月后，骨髓開始造血，出生后骨髓成為干細(xì)胞的主要來源，在造血組織中，所占比例甚少?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)中，造血干細(xì)胞在骨髓移植和疾病治療方面有重要作用。捐獻(xiàn)造血干細(xì)胞對捐獻(xiàn)者的身體并無很大傷害。造血干細(xì)胞造血干細(xì)胞又稱專能干細(xì)胞。是存在于造血組織中的一群原始造血細(xì)胞。也可以說它是一切血細(xì)胞（其中大多數(shù)是免疫細(xì)胞）的原始細(xì)胞。由造血干細(xì)胞定向分化、增殖...

2015 6-23
購買ELISA 試劑盒時應(yīng)該注意什么地方呢ELISA試劑盒在實驗室已經(jīng)相當(dāng)普及，現(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國產(chǎn)也有進(jìn)口，數(shù)量繁多令人目不暇接，怎樣才能選出zui適用的產(chǎn)品呢？首先當(dāng)然得根據(jù)我們所要檢測的分子進(jìn)行檢測，除此以外也還有一些需要加以考量的因素，下面小編為大家介紹以下幾點，僅供參考。1、重復(fù)性：科學(xué)實驗講求重復(fù)性，一般ELISA試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。2、特異性：ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分，抗體對有關(guān)。若抗體對中之一為多抗，另一個必須為單抗，建議使用雙單抗。3、...

2015 6-12
造血干細(xì)胞培養(yǎng)基配制人造血干細(xì)胞作為成體干細(xì)胞的重要組成，尤其在胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為造血干細(xì)胞的機理、CD34和CD45等表面標(biāo)志分子成功篩選、培養(yǎng)條件的優(yōu)化探索中取得了突破性進(jìn)展，這為治療惡性血液疾病、根本緩解血細(xì)胞來源緊張等臨床應(yīng)用提供了可能。本文就人類胚胎干細(xì)胞向造血干細(xì)胞方向分化的研究進(jìn)展作如下綜述，以期為致力于該研究領(lǐng)域工作的科研人員提供一些有益的參考。人體大部分骨頭的中央部門有骨腔,骨腔內(nèi)所含的物質(zhì)即骨髓.骨髓中有一種能起著造血功能的細(xì)胞就叫造血干細(xì)胞.人血中的紅細(xì)胞,血小板,淋...

2015 6-8
常用的融合蛋白分為哪幾類的呢常用的融合蛋白從分子量和用途上來分，一般可分為如下三類：1.小分子量的融合肽：這類標(biāo)簽蛋白只有幾個氨基酸，如polyHis，StrepII-tag，F(xiàn)LAG，c-myc-等，主要用于靶蛋白的純化，也可用于靶蛋白的輔助檢測，且由于分子量很小，幾乎不干涉靶蛋白的結(jié)構(gòu)，活性和功能，一般純化后不用去除標(biāo)簽，非常簡單方便。目前zui常使用的是polyHis標(biāo)簽蛋白，可使用金屬離子親和層析(IMAC)進(jìn)行純化，用梯度濃度咪唑溶液洗脫。當(dāng)靶蛋白為包涵體時，也可在變性條件下純化靶蛋白，容易實...

2015 6-5
華雅干細(xì)胞為你解答ELISA樣本值低于空白值的問題在ELISA實驗中，樣本值低于空白值是一個經(jīng)常性的問題。當(dāng)樣本值較低接近試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本值低于空白值的現(xiàn)象，特別是在血清和血漿樣本的檢測。究其原因，主要在于兩個方面，一方面是誤差，另一方面是基質(zhì)效應(yīng)。下文逐個分析不同影響因素的原理、和解決方案。一、基質(zhì)效應(yīng)分析中，基質(zhì)指的是樣本中被分析物之外的組分，基質(zhì)常常對分析物的分析過程有顯著的干擾，并影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，這些影響和干擾被稱為基質(zhì)效應(yīng)。ELISA試劑盒在開發(fā)過程中，標(biāo)準(zhǔn)品不能采用人或動物血清、血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線...

2015 5-27
華雅干細(xì)胞為你解答細(xì)胞培養(yǎng)常見問題1、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)品極大的影響。來自不同特種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。2、欲將一般動物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細(xì)胞，其離心速率一般為300xg（約1，000rpm），5-10分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡。3、冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放放37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其...

2015 5-26
原代細(xì)胞復(fù)蘇的基本操作方法及其常用耗材介紹一、實驗準(zhǔn)備（1）儀器：凈化工作臺、離心機、恒溫水浴箱、倒置相差顯微鏡、培養(yǎng)箱、液氮冰箱（2）玻璃器皿：吸管（彎頭、直頭）、培養(yǎng)瓶、玻璃瓶（250ml、100ml）、廢液缸（3）塑料器皿：吸頭、槍頭、膠塞、移液管（10ml）、15ml離心管、凍存管（1～2ml）（4）其他物品：微量加樣槍、紅血球計數(shù)板、記號筆、醫(yī)用橡皮膏、移液槍（5）試劑：PBS、小牛血清、培養(yǎng)液、雙抗（青霉素、鏈霉素）、胰蛋白酶（0.08%）二、操作步驟（1）從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并...

2015 5-25

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